Bilirubin Tozu CAS 635-65-4esas olarak safradan çıkarılır. Bilirubin suda çözünmez, benzen, kloroform ve karbon disülfür gibi organik çözücülerde çözünür ve etanol ve eterde az çözünür. Bilirubin ayrıca sıcak bir etanol ve kloroform karışımı içinde de çözülebilir. Bilirubinin sodyum tuzu suda kolayca çözünür, ancak kalsiyum, magnezyum ve baryum tuzları suda çözünmez. Bilirubin açık turuncu veya koyu kırmızımsı kahverengi renkte monoklinik bir kristaldir. Kuru katısı nispeten stabildir ve kloroform çözeltisi de karanlıkta nispeten stabildir. Alkali çözeltide (0.1 mmol/L sodyum hidroksit gibi) veya üç değerlikli demir iyonlarıyla karşılaştığında kararsızdır ve hızla biliverdine oksitlenir. Bilirubin glisin, alanin veya histidine bağlanabilir. Serum proteini, vitaminler veya EDTA eklemek bilirubini stabilize edebilir.
1. Kalsiyum tuzunun dolaylı ekstraksiyon yöntemiyle kalsiyum tuzunun hazırlanması: karıştırılarak taze domuz safrasına 3-3.5 kat doymuş kireç suyu süpernatantı ekleyin ve ardından 5-10dakika, Ph{ {4}}, gazlı bezle 50 dereceye kadar ısıtıldığında köpüğü çıkarın, kaynayana kadar ısıtmaya devam edin, 2 dakika bekletin, soğutun, süzün ve kalsiyum tuzu elde edin. Bilirubin bitmiş ürününün hazırlanması: Kalsiyum tuzunu alın ve macun yapmak için su miktarının 0,8 katı ekleyin, 30-40 elekten süzün, süzüntüye %0,3 antioksidan ekleyin, tuz ve asit ekleyin pH'ı 1,5'a ayarlamak için 4 saat bekletin, süzün, filtre kekine %80 etanol miktarının 8-10 katı ekleyin, ezin ve iyice karıştırın, antioksidan ekleyin, gece boyunca bekletin ve elde edilen ürün çökelti. %80 veya daha fazla etanol ve antioksidan miktarının 4-6 katı kadar ekleyin, karıştırın ve gece boyunca bekletin. Bu işlemi 3-4 kez tekrarlayın ve bitmiş bilirubin ürününü elde etmek için çökeltiyi 70 derecenin altında kurutun.
Kalsiyum tuzu çökeltmesi [HCl, ağır sodyum sülfit] → çökeltme [etanol, ağır sodyum sülfit] → çökeltme [70 derece ] → bilirubin ürünü.
2. Kloroform ekstraksiyon yöntemiyle kalsiyum bilirubinat hazırlanması: Taze domuz safrası, sodyum hidroksit ile pH 12'ye ayarlanır, kaynayana kadar ısıtılır, kalsiyum klorür çözeltisi eklenir, daha sonra kaynayana kadar ısıtılır, soğutulur, kalsiyum bilirubinat elde etmek için süzülür. Domuz safrası [NaOH, CaCl2] → [pH 12, 100 derece ] Bilirubin Tozunun Hazırlanması CAS 635-65-4 kalsiyum tuzu bilirubin bitmiş ürün: bilirubin kalsiyum tuzu, 1:1 hidroklorik asit ile pH 1-2'ya ayarlanır, asidik su boşaltılır, kloroform kloroformla ekstrakte edilir, susuz etanol ile yıkanır ve bilirubin bitmiş ürününü elde etmek için çözelti yaklaşık 5 derecede bırakılır.
Bilirubin kalsiyum tuzu [HCl] → [pH1-2] asit bileşiği [kloroform, susuz etanol] → [5 derece] bilirubin bitmiş ürün
3. Kalsiyum tuzunun asitleştirilmesi için geliştirilmiş kalsiyum tuzu yöntemi: Taze domuz safrasını alın ve %1 kalsiyum hidroksit ekleyin, iyice karıştırın, hızla 90-97 dereceye ısıtın, 10 dakika sıcak tutun ve elde edilene kadar filtreleyin. kalsiyum tuzu. 40 dereceye kadar ısıtmak, yavaşça çıkarılabilen gresin ortaya çıkmasına neden olacaktır. Elde edilen kalsiyum tuzu, fazla alkali ve diğer yabancı maddeleri uzaklaştırmak için bir kez sıcak su ile yıkanabilir. Kalsiyum tuzunu alın ve eşit şekilde dağıtmak için su miktarının 10 katından fazlasını ekleyin. %1 antioksidan ekleyin ve damla damla 1:2 hidroklorik asit eklemek için karıştırın (60 dev/dak). 40 dakika içinde pH 2,0'a ulaşın ve asidik bir madde elde etmek için pH değişmeden kalana kadar bekleyin. Domuz safrası [%1 kalsiyum hidroksit] → [90-97 derece, 15dk] Safra kalsiyum tuzu [antioksidan, hidroklorik asit] → [pH2,40dk] Asidik asit alkolle yıkama, suyla yıkama: Asitleştirilmiş bilirubin oda sıcaklığında eşit şekilde dağılır Etanol miktarının 10 katı ile pH 5'ten yüksek olmamalıdır, %0,5 antioksidan eklenir, karıştırılır ve katmanlama için yaklaşık 1 saat bekletilir. Alkol solüsyonunun üst katmanına gidin ve çöken bilirubini toplayın. Bilirubini 50 derece ılık suyla yaklaşık 5 dakika yıkayın, yüzen bilirubini toplayın, dehidrasyon için hızla etanol ekleyin ve ham bilirubini elde etmek için etanolü çıkarın. Asidik bileşik [etanol] → [1h] bilirubini çökeltir [50 derece sıcak su] → [etanol] ham bilirubin ekstraksiyonu, buharlaştırma, kristalleştirme ve kurutma: Ham bilirubini alın ve 10 kat kloroform ekleyerek 50 derecede 10 dakika boyunca çalkalayın. Gerekirse 2-3 kez ekstrakte edin; kalıntı beyaz olmalıdır. Kloroform ekstraktı neredeyse kuruyana kadar vakumla damıtmaya tabi tutuldu, bu da çoğu bilirubin kristalinin oluşmasıyla sonuçlandı. Oda sıcaklığına soğutulduktan sonra etanol ilave edildi ve 10 dakika süreyle 4 dereceye kadar soğutuldu. Bilirubin kristalleri filtrelendi ve susuz etanol veya eter ile işlendi, ardından yüksek kaliteli bilirubin elde etmek için vakumla kurutuldu.
Ham bilirubin [kloroform] → [10 dakika] kloroform çözeltisi [kristalleşme] → yüksek kaliteli bilirubin
4. İyon değiştirme reçinesi ekstraksiyon yöntemiyle hidroliz çözeltisinin hazırlanması: Taze inek safrasını alın, gazlı bezle süzün, karıştırırken pH'ı 10'a ayarlamak için 2mol/L sodyum hidroksit çözeltisi ekleyin, kaynatın ve hidrolizatı elde etmek için süzün.
Safra asidinin hidroliz solüsyonu reçine kolonu ile adsorpsiyonu ve elüsyonu: Kaynatılmış hidroliz solüsyonunu, çıkış suyunun rengi koyulaşıncaya ve adsorpsiyon doygun hale gelinceye kadar önceden ısıtılmış reçine kolonuna dökün.
Kolonun içindeki sıcaklık oda sıcaklığına düşene kadar soğuk su ekleyin ve ardından atık suyun pH'ını 1 yapmak için kolonun üst kısmından seyreltik sodyum bisülfit hidroklorür çözeltisi ekleyin.
%75 etanol ile yıkayın, eluent koyu yeşil bulanık bir çözelti olduğunda toplayın ve atık su berraklaşana ve pH nötre yakın olana kadar yıkayın. %95 etanol ile tekrar yıkayın.
Safra asidinin hazırlanması için etanol elüsyon çözeltisini toplayın. Hidroliz solüsyonu [iyon değiştirme kolonu] → [%75 etanol, %95 etanol] Bilirubin elüsyonu, konsantrasyonu ve kurutma için etanol elüenti: Kolondan %95 etanolün tamamını serbest bırakın, 10 dakika boyunca kloroformda bekletin ve kloroform elüentini, sarı renk ortaya çıkar.
Kloroform eluentini neredeyse kuruyana kadar damıtın, susuz etanol ekleyin ve kloroform kalmayıncaya kadar geri kazanmaya devam edin. Sıcakken süzün, bilirubini toplayın, kurutun ve bitmiş bilirubin ürününü elde edin.
Yolanda
Mobil: +86 -29-86107037-8012
E-posta:sales9@konochemical.com
Tel/Wechat: 18729555803